重编程因子的选择:核心因子:OSKM是维持胚胎干细胞多能性的关键基因。替代因子:GLIS1和NR5A2可替代cMyc,SALL4能提高重编程效率。cyclin D1和抑制TP53也可作为cMyc的替代物。其他辅助因子:miRNA、miRNA合成控制基因和表观基因组修饰因子,以及筛选出的化合物如8溴腺苷3,5环磷酸单磷酸盐和ALK5,都...
干货!iPSC-NK细胞疗法之重编程篇三
iPSCNK细胞疗法之重编程篇的要点如下:
重编程方法:
病毒载体方法:包括逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体和仙台病毒。逆转录病毒和慢病毒载体能高效整合重编程因子到宿主基因组,但存在安全性问题。腺病毒载体效率较低,而仙台病毒作为安全的病毒方法,避免了直接整合到细胞核内。基于DNA的方法:如使用质粒转导或PiggyBac转座子,质粒可以独自扩增,而PiggyBac转座子可在建立iPSC后被移除。RNA或蛋白质方法:通过修饰后的核苷酸合成编码重编程因子的RNA,或直接使用重组蛋白,这些方法提供了最小的整合风险。重编程因子的选择:
核心因子:OSKM是维持胚胎干细胞多能性的关键基因。替代因子:GLIS1和NR5A2可替代cMyc,SALL4能提高重编程效率。cyclin D1和抑制TP53也可作为cMyc的替代物。其他辅助因子:miRNA、miRNA合成控制基因和表观基因组修饰因子,以及筛选出的化合物如8溴腺苷3,5环磷酸单磷酸盐和ALK5,都能增强重编程效率。亲代细胞的选择:
常见来源:小鼠成纤维细胞易于处理且增殖旺盛,但人类原代成纤维细胞需皮肤活检。更易获取的细胞来源包括外周血细胞、造血干细胞、间充质干细胞等。其他来源:脐血、羊膜细胞、神经干细胞、黑素细胞等也被成功重编程。体内所有细胞似乎都具有成为iPSC的潜力,但效率不同。培养条件:
饲养细胞:人类iPSC通常在饲养细胞上生成和维持。临床使用条件:无饲养物质和无异源培养条件是必要的。总结:iPSCNK细胞疗法的重编程篇涉及多种重编程方法、重编程因子的选择、亲代细胞的选择以及培养条件。在临床应用中,安全性和效率同等重要,因此选择理想的重编程方法和培养条件至关重要。
2025-04-13